Después de secuenciar completamente los genomas latentes del "provirus" del VIH de 19 personas que están siendo tratadas por el VIH, los científicos de Johns Hopkins Medicine informan que incluso en pacientes que comienzan el tratamiento muy temprano, el único método ampliamente disponible para medir el reservorio de VIH latente en pacientesestá contando principalmente los virus defectuosos que no causarán daño, en lugar de aquellos que pueden volver a entrar en acción y mantener las infecciones.
Específicamente, los investigadores mostraron que más del 90 por ciento de los provirus latentes son fallas genéticas, tan mutadas, incluso en las primeras etapas de la enfermedad, que ya no funcionan. Los hallazgos, descritos el 8 de agosto en Medicina natural en línea, sugiere una necesidad urgente de nuevas formas de contar solo los provirus no dañados, porque un recuento preciso es clave para guiar y medir la efectividad de las terapias experimentales dirigidas al reservorio latente del VIH.
"Para curar el VIH, desea deshacerse de los provirus sin defectos", dice el autor principal del estudio, Robert Siliciano, MD, Ph.D., médico de enfermedades infecciosas y biólogo molecular de la Facultad de Medicina de la Universidad Johns Hopkins ".Pero nuestro trabajo muestra que los ensayos estándar que se utilizan para medir son formas del virus que no son realmente relevantes para estas estrategias de curación ".
La infección por VIH se trata actualmente con terapias antirretrovirales ART que son eficaces para evitar que el virus se copie a sí mismo para producir más virus. Pero el virus persiste porque en su forma latente, se esconde con éxito dentro de ciertas células del sistema inmunológico sin replicarse activamente ysin producir señales químicas que hagan que los virus sean objetivos de ART.
Sin embargo, los provirus pueden activarse, y de hecho lo hacen, provocando un nuevo brote de infección en pacientes que han interrumpido el TAR. Los esfuerzos para eliminar los reservorios de virus latentes, hasta ahora infructuosos, se han convertido en una especie de Santo Grial para los virólogos, Silicianonotas.
Para probar la efectividad de nuevas estrategias de medicamentos experimentales que tienen como objetivo curar el VIH mediante la eliminación de los provirus, agrega, los científicos generalmente toman "instantáneas" de los niveles de reservorio de provirus antes y después de administrar los tratamientos. La mayoría de las veces, utilizan una técnicallamada reacción en cadena de la polimerasa PCR para cuantificar la presencia de ciertos genes delatores del VIH. Pero incluso los provirus defectuosos, siempre que contengan los genes que se están contabilizando, se cuentan.
Sin embargo, hasta ahora, los investigadores no pensaban que eso siempre fuera un problema. "La mayoría de nosotros en el campo asumimos que el grupo inicial de provirus latentes, inmediatamente después de la infección, contenía copias completamente funcionales del virus, por lo que también asumimosque la PCR, al menos para los pacientes tratados con ART al principio del curso de la infección, estaría contando principalmente los provirus que tenían la capacidad de causar la enfermedad nuevamente ", dice Katherine Bruner, estudiante de posgrado en el laboratorio de Siliciano y primera autora del nuevoSin embargo, para los pacientes que estaban más avanzados en el curso de su enfermedad cuando comenzaron el tratamiento con TAR, los investigadores sospecharon que era probable que un porcentaje mayor de virus latentes fueran defectuosos. Una fracción de los provirus que no son defectuosos pueden ser detectados por unamétodo laborioso, llamado ensayo cuantitativo de crecimiento viral QVOA, que se consideró la mejor manera de medir el tamaño del reservorio.
Preguntándose si alguna de las técnicas contaba con precisión los provirus del VIH potencialmente causantes de problemas, Siliciano, Bruner y sus colegas secuenciaron los genomas completos de una gran cantidad de provirus de 19 hombres y mujeres de varias razas entre las edades de 20 y 76 que teníancomenzó el TAR, ya sea menos de 100 días después de la infección o más de 180 días después. Todos habían estado en TAR durante al menos ocho meses.
Entre el 90 y el 98 por ciento de los provirus de cualquier paciente, encontraron los investigadores, eran defectuosos e incapaces de replicarse para convertirse en un virus activo. Los resultados se mantuvieron verdaderos si los pacientes habían comenzado el TARV a las pocas semanas o años de contraer el VIH.
"Incluso en pacientes tratados muy temprano, si está utilizando un enfoque basado en PCR para medir el reservorio, en realidad solo está detectando muchos provirus defectuosos", dice Bruner.
Cuando el equipo de investigación comparó los datos de secuenciación completos con los análisis de los provirus de los mismos pacientes realizados con PCR o QVOA, mostraron que la PCR sobrestima el tamaño real del reservorio latente en una mediana de 188 veces en los pacientes que comenzaron el tratamiento másseis meses después de la infección por el VIH, y 13 veces en los pacientes que comenzaron el tratamiento antes, mientras que la QVOA subestima el reservorio en una mediana de 27 veces en los pacientes que comenzaron el tratamiento tarde y 25 veces en los que comenzaron el tratamiento temprano.
El método de secuenciación completo utilizado en su nueva investigación, dice Bruner, "es muy útil desde el punto de vista de la investigación, pero requiere mucho tiempo, es caro y no es práctico para un amplio uso clínico". Así que, por ahora, los dos métodos de reserva inexactos son todo lo quelos investigadores tienen, dice ella.
Bruner y Siliciano dicen que esperan que sus resultados, que muestran que los pacientes albergan muchos más provirus defectuosos de lo que se pensaba anteriormente, y que estos provirus defectuosos se acumulan casi inmediatamente después de la infección, ayuden a los investigadores a comprender mejor lo que realmente significan los resultados de PCR y QVOA.
"Con los métodos de recuento actuales, parece que puede incluir el rango de tamaño real", dice Siliciano. "Pero nos gustaría encontrar mejores formas de hacer las mediciones".
Más de 36 millones de personas en todo el mundo viven con el VIH y 17 millones están recibiendo tratamiento con TAR, según las últimas estimaciones de la ONU. Alrededor de 1,2 millones de personas en los EE. UU. Tienen la enfermedad. Los investigadores están siguiendo múltiples líneas de investigación quetienen como objetivo desarrollar curas para la infección dirigiéndose al reservorio latente, incluidos los compuestos que mantienen a los provirus suprimidos permanentemente, los que los obligan a activarse para que el ART o el sistema inmunológico puedan bloquearlos, y enfoques que se dirigen a las células T donde el virus latentese esconde.
Fuente de la historia :
Materiales proporcionados por Medicina de Johns Hopkins . Nota: el contenido se puede editar por estilo y longitud.
Referencia de la revista :
cite esta página :