En un documento que se publicará en la edición de septiembre / diciembre de 2019 de TECNOLOGÍA , un equipo de investigadores del Departamento de Ingeniería Biomédica del Instituto de Tecnología de Illinois, Chicago ha desarrollado un novedoso dispositivo microfluídico para medir en tiempo real el colesterol secretado por los hepatocitos humanos que contienen chips de tejido hepático. Su innovación radica no solo enel desarrollo del primer ensayo en tiempo real en chip para la detección del colesterol, pero también para adaptar la química del ensayo, que es común en el ensayo enzimático convencional para colesterol basado en placas de pozos al formato microfluídico y localizarlo en las perlas microscópicas.ayudar a los investigadores que emplean cultivos de microfluidos para estudiar los efectos de medicamentos como las estatinas en la reducción del colesterol en tiempo real.
Los chips de tejido son una herramienta importante en el desarrollo de fármacos que tratan diferentes afecciones de salud, así como para comprender los mecanismos subyacentes de diferentes tejidos. Sin embargo, existe un desafío general en la utilización de chips de tejido para aplicaciones amplias debido a la pequeñavolúmenes de muestra, la evaluación en chip de la función celular a menudo es bastante limitada. Abhinav Bhushan, Ph.D., Profesor Asistente del Instituto de Tecnología de Illinois IIT, Chicago, quien es el investigador principal de esta investigación, dice
"Los cultivos de células microfluídicas basadas en perfusión producen volúmenes de muestra bajos que no se pueden usar para análisis usando ensayos bioquímicos convencionales. Nuestro ensayo enzimático basado en perlas para la medición del colesterol es el primer ensayo informado que puede cuantificar el colesterol secretado por los hepatocitos humanos en tiempo real enEste método es novedoso ya que es el primer uso reportado de un sistema inmovilizado de enzimas basado en perlas en combinación con detección visual para cuantificar el colesterol en tiempo real y prevemos que nuestro ensayo puede allanar el camino para permitir estudios que utilicen perfusión en microfluídica.que produce bajos volúmenes de muestra "
El sistema de detección de colesterol enzimático a base de perlas utiliza peroxidasa de rábano picante que se inmoviliza en perlas de poliestireno; toda la reacción de oxidación del colesterol tiene lugar en la perla. Esta reacción de oxidación genera una señal fluorescente al formar resorufina, haciendo que las perlas parezcan fluorescentes.se puede visualizar como una serie de imágenes, donde la intensidad de la fluorescencia es directamente proporcional a la cantidad de colesterol en la muestra. La simple química y detección utilizada en este ensayo hace que el ensayo sea más adaptable a un entorno de laboratorio.
"Si bien la aplicación de sistemas de detección de biomoléculas como la electroforesis, la espectroscopía de masas, la ionización por electropulverización y la detección fluorométrica utilizando un tubo fotomultiplicador se han llevado a cabo en el pasado, esta es la primera vez que se cuantifica una molécula no proteica enEn tiempo real y en chip usando perlas de enzimas inmovilizadas. Es la simplicidad de la química del ensayo y su potencial de adaptación lo que hace que nuestro ensayo de microfluidos sea único ", dice Sonali Karnik, Ph.D., quien es el autor principal del artículo.
El siguiente paso para ellos, dice el equipo, es multiplexar su ensayo enzimático con una química de ensayo diferente para la detección simultánea de múltiples moléculas.
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Materiales proporcionado por Científico mundial . Nota: El contenido puede ser editado por estilo y longitud.
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