Una gota de sangre en papel de filtro, que se deja secar y se almacena para futuros propósitos de diagnóstico, considerablemente más fácil que el método actual que consume recursos utilizando muestras de sangre congeladas en tubos de plástico. En un nuevo estudio, los investigadores de Uppsala han tenido éxitomidieron 92 proteínas diferentes en círculos de tamaño milimétrico extraídos de muestras secas. Han demostrado que este método tiene un gran potencial para ahorrar recursos, en beneficio del diagnóstico y el tratamiento tempranos.
Las muestras de sangre almacenadas son de suma importancia para encontrar marcadores de enfermedades que puedan usarse para la detección temprana de enfermedades, cuando todavía son curables. Hoy en día, los tubos de ensayo que contienen volúmenes relativamente grandes mililitros de plasma sanguíneo se mantienen en grandes cantidades de energía.congelación de congeladores a -80 ° C. Un paciente debe ir primero a una unidad de atención médica donde una enfermera capacitada obtiene una muestra de sangre venosa, que se envía a un laboratorio para la separación centrífuga de plasma. La muestra puede analizarse y / o guardarse enun biobanco para futuros estudios. Este método que consume recursos significa, por ejemplo, que el Hospital de la Universidad de Uppsala actualmente guarda solo el 1% de todas las muestras en un biobanco, mientras que el resto se descarta después de un análisis inicial.
El nuevo método podría cambiar radicalmente esta situación y tener un valor crucial para el desarrollo de la atención médica futura. El estudio muestra que muy poco le sucede a las proteínas cuando se dejan secar. En muchos casos, permanecen completamente inalteradas después de 30 años, ocambiar solo mínimamente. En consecuencia, las muestras secas podrían usarse para los controles de rutina de los servicios de salud. Estas podrían realizarse en el sector de servicios de laboratorio de rápido crecimiento, permitiendo a las personas investigar su estado de salud sin involucrar a los servicios médicos y de salud.también se puede utilizar para establecer biobancos a gran escala. Los costos en el sector de la salud se desplomarían, se podrían analizar más muestras y se podría guardar una alta proporción de todas las muestras de sangre tomadas.
"Esto tiene varias implicaciones. Primero, puede pincharse el dedo y enviar una mancha de sangre seca por correo. En segundo lugar, a un costo mínimo, será posible construir biobancos gigantes de muestras obtenidas de forma clínica de rutina.Esto significa que se pueden tomar muestras antes del debut clínico de una enfermedad, para identificar marcadores de valor para el diagnóstico temprano, mejorando el alcance del tratamiento curativo ", dice Ulf Landegren, profesor de medicina molecular y jefe del grupo de investigación Molecular Tools.
En el presente estudio, los científicos analizaron las manchas de sangre seca DBS. Algunas se recolectaron recientemente, mientras que otras se conservaron durante 30 años en biobancos en Suecia y Dinamarca que almacenan muestras de DBS tomadas de todos los recién nacidos para su detección.de unos 20 trastornos metabólicos congénitos. Estos dos biobancos mantienen su DBS a diferentes temperaturas: el sueco a + 4 ° C y el danés a −24 ° C. Las muestras se utilizaron para analizar los niveles de 92 proteínas que son relevantes en oncologíaTambién se utilizaron muestras de plasma húmedo, mantenidas a -70 ° C durante los períodos de tiempo correspondientes. Además, para poder distinguir los efectos del almacenamiento a largo plazo, los investigadores examinaron qué sucede con la detección de proteínas comoefecto del proceso de secado.
"Nuestra conclusión es que podemos medir los niveles de 92 proteínas con muy alta precisión y sensibilidad utilizando la tecnología PEA en los discos pequeños y perforados de una mancha de sangre seca. El proceso de secado real tiene un efecto insignificante en las diversas proteínas yel efecto es reproducible, lo que significa que puede incluirse en el cálculo ", dice Johan Björkesten, un estudiante de doctorado en la Universidad de Uppsala y el primer autor del estudio.
Desarrollo y método adicionales
El interés en usar biobancos para buscar proteínas o moléculas de ARN que puedan reflejar dinámicamente la progresión de la enfermedad está creciendo rápidamente. Las colecciones de muestras que comprenden muchas muestras tomadas regularmente de los mismos individuos son muy importantes para identificar biomarcadores de este tipo. Esto tiene dos ventajas. Primero, con el tiempo, los individuos pueden servir como sus propios controles. Segundo, después de que una persona se ha enfermado, las muchas muestras tomadas mejoran el alcance para localizar muestras de pacientes tomadas antes del inicio de la enfermedad, en una fase en la que el diagnóstico temprano puede ser particularmenteUna condición previa para esto es la disponibilidad de grandes cantidades de muestras, recolectadas regularmente de muchas personas. Esto hace que sea esencial que los costos de las muestras individuales sean bajos y que todo el proceso, desde el muestreo hasta el almacenamiento, sea muy simple y preferiblemente requierasin personal sanitario involucrado
El uso de DBS ofrece una variedad de ventajas sobre el uso de muestras "húmedas". Los ejemplos son un estrés mínimo para los pacientes, ya que es suficiente un pinchazo pequeño y autoadministrado en el dedo; los costos de recolección y almacenamiento son bajos; no hay personal altamente capacitadose requiere para el muestreo; las muestras se pueden enviar por correo postal; y las condiciones de almacenamiento son simples. Una de las principales limitaciones de las muestras secas, por otro lado, ha sido la pequeña cantidad de sangre tomada, que descarta muchos métodos analíticos tradicionales.
El almacenamiento de DBS a largo plazo afecta la detectabilidad de ciertas proteínas más que otras. La mayoría de las proteínas permanecen completamente intactas después de 30 años, o cambian solo mínimamente, mientras que los niveles medidos de algunas proteínas disminuyen de modo que la mitad de la cantidad permanece después de un período de entre 10y 50 años. Los investigadores también descubrieron que una temperatura de almacenamiento relativamente baja es preferible para las proteínas que se ven afectadas por el almacenamiento. En comparación con el almacenamiento de plasma húmedo a -70 ° C, encontraron que esto preservaba las proteínas mejor que el almacenamiento de DBS a -24° C.Esta parte del análisis fue, sin embargo, complicada por algunos factores de confusión que hicieron que la conclusión fuera menos clara.
El método de ensayo de extensión de proximidad PEA permite la detección de niveles de 96 proteínas incluidos 4 controles de un disco de 1,2 mm de diámetro extraído de una mancha de sangre seca DBS en papel de filtro. PEA, basado en una investigación en UppsalaUniversity, ha sido desarrollado en un producto comercial, Proseek Multiplex, por la compañía de Uppsala Olink. Hasta la fecha, la compañía ha utilizado el método para analizar un cuarto de millón de muestras de plasma húmedo.
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Materiales proporcionado por Universidad de Uppsala . Nota: El contenido puede ser editado por estilo y longitud.
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