University Medicine Berlin, Departamento de Cirugía General, Visceral y de Trasplante, dirigido por el Dr. Georg Damm y el Prof. Dr. Daniel Seehofer han establecido un protocolo para un aislamiento sin complicaciones de hepatocitos humanos primarios PHH, células de Kupffer KC, células endoteliales del hígado LEC y células estrelladas humanas HSC del tejido donante humano. Las células hepáticas se aislaron del tejido utilizando una técnica de perfusión EDTA / colagenasa de dos pasos, seguida de una separación de PHH y diferentes no parénquimalesfracciones celulares NPC mediante centrifugación en gradiente de densidad Percoll, un paso de separación de adherencia KC y clasificación celular activada magnéticamente HSC, LEC. Todas las fracciones celulares aisladas se identificaron por características morfológicas y funcionales específicas y se examinaron durante un tiempo de cultivo definido.
Los resultados, que aparecen en la edición de mayo de 2015 de Biología y medicina experimental , proporciona un nuevo método simplificado para el aislamiento y el fraccionamiento de las células hepáticas humanas, que se puede utilizar para establecer modelos de cocultivo definidos que reflejen la situación in vivo en el órgano, por ejemplo, para estudios sobre toxicidad de fármacos o para el desarrollo de modelos de enfermedades.
"Los monocultivos de PHH se consideran el estándar de oro para la investigación del metabolismo hepático y la toxicidad de los xenobióticos. Sin embargo, estudios morfológicos y funcionales detallados han demostrado que estos modelos son limitados debido a la desdiferenciación de los hepatocitos y la pérdida de funciones dentro de unos pocosdías. La reconstrucción de la arquitectura de tejido in vivo que consiste en un entorno 3D que incluye NPC es un enfoque prometedor para resolver algunos de estos problemas ", afirma el Dr. Georg Damm." En conclusión, presentamos un nuevo método para la extracción simultánea de PHH humana y diferentesPoblaciones de NPC del mismo tejido donante. Las células se identificaron claramente y se caracterizaron sobre la base de las propiedades morfológicas, la expresión de marcadores específicos y el análisis funcional ".
Se necesitan estudios futuros para monitorear el destino y la diafonía de la APN aislada en modelos de cocultivo funcional y micro-tejidos diseñados. En este sentido, las células aisladas en el protocolo de aislamiento publicado forman la base in vivo como fisiológica y patológica-modelos fisiológicos del hígado.
Dr. Steven R. Goodman, editor en jefe de Biología y medicina experimental , dijo "Pfeiffer et al. Han proporcionado un método para el aislamiento simultáneo de PHH humana y distintas poblaciones de NPC del mismo tejido humano. El valor de este nuevo método será para el cocultivo de hepatocitos y fracciones distintas de NPC quees prometedor para el futuro de las pruebas de drogas y la ingeniería del tejido hepático ".
Fuente de la historia :
Materiales proporcionados por Sociedad de Biología Experimental y Medicina . Nota: El contenido puede ser editado por estilo y longitud.
Referencia del diario :
Cite esta página :