Investigadores de EMBL, ESPCI París y la Iniciativa Internacional de Vacunas contra el SIDA han desarrollado una nueva técnica para clasificar rápidamente los virus del VIH, que podría conducir a un desarrollo más rápido de una vacuna para el VIH, como informan en Biología química celular .
La técnica permitirá a los científicos identificar características específicas en las proteínas de la superficie del virus que son reconocidas por el sistema inmunológico y provocar una respuesta similar a la observada en los controladores de élite: pacientes que pueden sobrevivir sin tratamiento antiviral.
Alrededor del 1% de los pacientes con VIH, conocidos como controladores de élite, pueden sobrevivir sin tratamiento antivírico, porque su sistema inmunológico produce ciertos tipos de anticuerpos específicos del VIH: proteínas que reconocen características en la superficie del virus y se unenpara ellos, haciendo que el virus sea inactivo. El desafío en el desarrollo de una vacuna contra el VIH es identificar características específicas en las proteínas en la superficie del virus que son reconocidas por el sistema inmunológico y provocan una respuesta similar a la observada en los controladores de élite.
Una técnica ampliamente utilizada para estudiar proteínas en la superficie de las células, que a veces también se usa con virus, es la clasificación de células activadas por fluorescencia FACS. Se toma una muestra de células y se agregan anticuerpos fluorescentes que se unen a la superficieproteínas que le interesan. Las células con proteínas que son reconocidas por los anticuerpos se volverán fluorescentes, mientras que las células que carecen de dichas proteínas no lo harán. Luego, puede medir la fluorescencia de cada célula individualmente, enviando las células fluorescentes a un recipiente para su posterior estudio,y las células no fluorescentes en otra. Esto funciona bien para estudiar células, que tienen cientos de proteínas de superficie a las que los anticuerpos se unen, produciendo una fuerte señal de fluorescencia. FACS también se puede utilizar para clasificar virus grandes como el virus del Ébola,pero para estudiar virus más pequeños con menos proteínas de superficie, como el VIH, FACS no es lo suficientemente sensible. Ahora, los investigadores de EMBL, ESPCI París y la Iniciativa Internacional de Vacunas contra el SIDA han desarrolladodesarrollaron una nueva técnica para clasificar rápidamente los virus del VIH, que podría conducir a un desarrollo más rápido de una vacuna para el VIH, como informan en Cell Chemical Biology.El autor del estudio, Christoph Merten, explica.
¿Qué hiciste?
Desarrollamos un sistema que nos permite analizar y clasificar el VIH a una velocidad de cientos de virus por segundo, separando los virus según si sus proteínas de superficie tienen características reconocidas por anticuerpos específicos o no. En lugar de utilizar anticuerpos fluorescentes que se uniríandirectamente a las proteínas virales, produciendo solo una señal débil, tomamos los anticuerpos ordinarios no fluorescentes y los unimos a una enzima llamada fosfatasa alcalina AP. Luego, encerramos los virus individualmente en gotitas de líquido, junto con unsustancia química que se vuelve fluorescente cuando actúa sobre la AP. Los anticuerpos se unen a las proteínas virales y las enzimas AP unidas producen muchas moléculas fluorescentes que permanecen dentro de la gota de líquido, creando una fuerte señal de fluorescencia. Si las proteínas del virus no tienen elcaracterísticas, los anticuerpos con sus enzimas AP no se unen y no se produce fluorescencia. Por lo tanto, podemos estudiar virus individuales, clasificándolos con alta precisiónsegún muestren características que podrían aprovecharse en el desarrollo de una vacuna contra el VIH.
El nuestro es un sistema de microfluidos; en otras palabras, utiliza tecnología diseñada para manipular cantidades extremadamente pequeñas de líquido. Todo el sistema está contenido en un 'chip' de microfluidos, un dispositivo del tamaño de la palma de la mano que consta de redes microscópicas de canales paralíquido para fluir a través. Estos canales tienen solo unas pocas centésimas de milímetro de ancho, y cada gota en nuestros experimentos tiene alrededor de 30 mil millonésimas de mililitro. Los chips de microfluidos ofrecen ventajas particulares cuando se trabaja con patógenos como el VIH, ya quepor lo tanto, muy seguro de usar.Los sistemas FACS típicos pueden producir gotas en el aire, por lo que se requieren medidas de contención mucho más estrictas cuando se trabaja con bacterias y virus dañinos.
¿Por qué importa?
Nuestro método permite analizar y clasificar los virus del VIH en cantidades y velocidades que antes no había sido posible. Esto nos permite probar rápidamente millones de variantes virales, lo que debería acelerar significativamente el proceso de desarrollo de la vacuna.
En nuestros experimentos, cada gota contenía un virus y anticuerpos, pero también debería ser posible agregar una célula a la gota y estudiar si los anticuerpos pueden evitar que el virus ingrese a la célula. Eso no es posible con FACS, por lo que se abremuchas posibilidades para futuras investigaciones.
Fuente de la historia :
Materiales proporcionado por Laboratorio Europeo de Biología Molecular EMBL . Original escrito por Edward Dadswell. Nota: el contenido se puede editar por estilo y longitud.
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