Los investigadores comúnmente cultivan bacterias para muchos propósitos, como para examinar productos farmacéuticos y fabricar vacunas. En estos casos, los matraces de agitación se han usado comúnmente y generalmente durante más de 90 años para cultivar microbios.
Para realizar un seguimiento de lo que sucede en el matraz de agitación, los investigadores deben usar técnicas de esterilización estrictas mientras extraen una muestra de células. Una técnica de esterilización común es exponer el tapón y el matraz a una llama en varios puntos de tiempo durante la extracción de la célula. Sin embargo, si esta esterilización afecta el cultivo celular de alguna manera, puede obstaculizar inadvertidamente la producción de la vacuna o cualquier sustancia que desee del cultivo.
En un estudio publicado recientemente en Informes científicos , investigadores de la Universidad de Tsukuba han demostrado que la esterilización por llama introduce dióxido de carbono en los matraces de agitación. Este exceso de dióxido de carbono puede afectar considerablemente el crecimiento celular.
El dióxido de carbono es un producto de la combustión de metano en la llama. Los investigadores descubrieron que flamear el matraz incluso unos segundos más, o inclinar el matraz unos grados más, aumentaba considerablemente la concentración de dióxido de carbono en el matraz.
"Por ejemplo, con un tiempo de exposición a la llama de solo 5 s, el aumento del ángulo de inclinación de 15 ° a 25 ° aumentó la concentración de dióxido de carbono en el espacio de cabeza en aproximadamente un 50%", dice el profesor Hideki Aoyagi, autor principal del estudio"El modelado computacional confirmó nuestros hallazgos".
Estos aumentos en la concentración de dióxido de carbono se inducen en el transcurso de solo unos segundos de esterilización por llama. ¿Pero afectan sustancialmente el crecimiento celular? Para probar esta hipótesis, los investigadores necesitaban agregar un exceso de dióxido de carbono mientras mantenían los matraces temblando, porqueinterrumpir el temblor puede afectar el crecimiento celular.
"Introdujimos dióxido de carbono intermitente a concentraciones similares a las esperadas por la esterilización por llama", explica el profesor Aoyagi. "La demanda final de oxígeno de Acetobacter pasteurianus, conocido por estropear el vino, aumentó hasta en un 70%. Pelomonas saccharophila aumentó enhasta 35%, mientras que los otros dos microbios no se vieron claramente afectados en términos de crecimiento "
Los investigadores aún no saben qué tan común es flamear un matraz de agitación para alterar el crecimiento del cultivo celular. Sin embargo, las variables de esterilización experimental aparentemente menores, demasiado sutiles para que la mayoría de los investigadores lo noten a primera vista, pueden ser pertinentesEl cultivo de microbios en matraces de agitación y la producción de productos valiosos en el cultivo, tal vez relevantes para la investigación de COVID-19, pueden ser sustancialmente más complicados de lo que se apreciaba anteriormente.
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Materiales proporcionado por Universidad de Tsukuba . Nota: El contenido puede ser editado por estilo y longitud.
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