En experimentos de prueba de concepto, los investigadores de la Universidad de Alabama en Birmingham han destacado una terapia potencial para un trastorno de coagulación de la sangre raro pero potencialmente mortal, TTP. Los investigadores administran esta enzima terapéutica a través del equivalente celular de un caballo de Troya, utilizandopequeñas plaquetas de células sanguíneas como su vehículo de entrega de protección, con una enzima clave oculta en su interior.
TTP, o púrpura trombocitopénica trombótica, aparece como coágulos sanguíneos en arteriolas pequeñas en todo el cuerpo, particularmente en el cerebro, corazón, páncreas y riñones, lo que resulta en daño a los órganos. El inicio de los síntomas puede ser repentino e inespecífico, ela tasa de mortalidad hospitalaria sigue siendo tan alta como 20 por ciento
TTP es causado por la falta de la enzima ADAMTS13 en la sangre, con mayor frecuencia debido a los autoanticuerpos contra esta enzima. ADAMTS13 normalmente actúa para escindir una proteína grande llamada factor von Willebrand, que está involucrado en la coagulación de la sangre. La pérdida de la enzima permite la destruccióncoágulos microvasculares para formar en tejidos importantes de órganos.
Investigadores de la UAB, dirigidos por X. Long Zheng, MD, Ph.D., Robert B. Adams Profesor y Director de División de Medicina de Laboratorio en el Departamento de Patología de la Facultad de Medicina de la UAB, ahora han informado que las plaquetas pueden absorber espontáneamenteADAMTS 13. La enzima se mantiene estable en esas células, y las plaquetas pueden entregar la enzima efectivamente donde se necesita.
En experimentos ex vivo con sangre humana de pacientes con TTP y experimentos in vivo con un modelo de TTP en ratones, los investigadores demostraron que ADAMTS13 recombinante humano, o rADAMTS13, transportado en las plaquetas puede reducir "dramáticamente" la tasa y la cantidad final de sangreformación de coágulos en arteriolas lesionadas.
"Nuestros resultados demuestran por primera vez que la transfusión de plaquetas cargadas con rADAMTS13 puede ser un enfoque terapéutico novedoso y potencialmente efectivo para la trombosis arterial, asociado con TTP congénita e inmunomediada", dijo Zheng. "Este enfoque novedoso podría traducirseal cuidado del paciente una vez que rADAMTS13 reciba la aprobación de la Administración de Drogas y Alimentos de los EE. UU. para la terapia de TTP congénita ".
En un trabajo anterior publicado en Blood en 2015, los investigadores de la UAB crearon ratones transgénicos, donde rADAMTS13 humano se expresó exclusivamente en las plaquetas. En un contexto de ratones que carecen de su propia enzima ADAMTS13, las plaquetas cargadas con rADAMTS13 bloquearon la trombosis arterial y previnieron la TTPen el modelo del mouse.
Como el siguiente paso hacia la atención del paciente, Zheng y sus colegas trataron de determinar si las plaquetas fuera del cuerpo podrían cargarse con rADAMTS13, como en la sangre recolectada para transfusiones. Si es así, también querían evaluar si la transfusión con esos rADAMTS13-las plaquetas cargadas podrían ser tan efectivas para bloquear la trombosis y prevenir la TTP en ratones como las plaquetas transgénicas que expresaron altos niveles de rADAMTS13.
Cuatro experimentos clave: descritos en un estudio publicado en la revista American Heart Association Arteriosclerosis, trombosis y biología vascular o ATVB - respondió esas preguntas
Primero, los investigadores incubaron plaquetas humanas aisladas, que tienen una quinta parte del diámetro de los glóbulos rojos y tienen una función normal para detener el sangrado de los vasos sanguíneos, durante hasta dos horas en concentraciones variables de rADAMTS13 a temperaturas variables.A la temperatura fría de 4 C, las plaquetas no tomaron rADAMTS13. Pero a 25 y 37 C, las plaquetas tomaron rADAMTS13, aparentemente a través de la endocitosis, de una manera dependiente de la concentración.
En segundo lugar, demostraron que el rADAMTS13 absorbido por las plaquetas humanas permaneció intacto y enzimáticamente activo contra el factor von Willebrand, un ingrediente clave para la adhesión y agregación plaquetaria. Además, el rADAMTS13 fue liberable en condiciones de cizalladura arterial que provocan la ruptura de los agregados plaquetarios., como se simula con canales microfluídicos.
Tercero, al usar canales microfluídicos recubiertos con un colágeno fibrilar que simula el flujo en las arteriolas y presenta una superficie para la formación de coágulos, mostraron que la adición de plaquetas cargadas con rADAMTS13 a la sangre normal de pacientes con TTP y TTP reconstituida inhibió drásticamente in vitroformación de trombos bajo flujo arterial.
Finalmente, mostraron que la transfusión de las plaquetas de ratón cargadas con rADAMTS13 en ratones genéticamente modificados que carecen de ADAMTS13 inhibió drásticamente la formación de trombos en las arteriolas abdominales después de una lesión.
Por lo tanto, puede ser posible empaquetar rADAMTS13 dentro de las plaquetas humanas durante el tiempo en que las bolsas de sangre donada permanecen a temperatura ambiente durante tres días, ya que se analizan en busca de múltiples marcadores de enfermedades infecciosas. Estas plaquetas empaquetadas se pueden transfundir a pacientes con TTPSi bien no se recomienda la transfusión de plaquetas de rutina en pacientes con PTT, la transfusión de plaquetas cargadas con rADAMTS13 mostró claramente un beneficio terapéutico al inhibir la formación de trombos en sangre humana y de ratón que carece de la enzima ADAMTS13.
Otros investigadores han trabajado en estrategias terapéuticas para evitar el autoanticuerpo para el tratamiento con TTP, con cierto éxito. Sin embargo, a diferencia del enfoque de Zheng con plaquetas-ADAMTS13, ninguna de esas estrategias ha abordado el mecanismo subyacente de TTP: la falta de ADAMTS13 y / oautoanticuerpo contra ADA
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Materiales proporcionado por Universidad de Alabama en Birmingham . Nota: El contenido puede ser editado por estilo y longitud.
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