Un equipo de investigación del Instituto Alemán de Leibniz para la Investigación de Zoológicos y Vida Silvestre Leibniz-IZW desarrolló un método para aislar y criopreservar las células testiculares. Esto permitirá la custodia y biobanca de los gametos y otras células del tracto reproductivo masculino amenazado oespecies felinas en peligro de extinción. Los hallazgos han sido publicados en la revista científica " Criobiología . "
La criopreservación en nitrógeno líquido a -196 ° C es un procedimiento común para almacenar células germinales esperma y óvulos y embriones, pero puede ser dañino para las células. Inicialmente, el equipo probó dos "velocidades de congelación" diferentes, según el grado de congelaciónel daño depende en gran medida de la velocidad de reducción de la temperatura durante el proceso de congelación. Para garantizar que las células germinales y los embriones vuelvan a funcionar después de la descongelación, generalmente se aplican crioprotectores antes de la congelación. Estos deben penetrar las células antes de que baje la temperatura para evitar o debilitarsela formación de cristales de hielo dentro de las células y así evitar daños. Dado que los crioprotectores más utilizados son citotóxicos a concentraciones más altas, los científicos probaron dos concentraciones diferentes para congelarlas.
Mientras que generalmente un crioprotector penetra las células individuales con relativa rapidez, las células dentro del tejido de un órgano son difíciles de alcanzar por el crioprotector. Por lo tanto, en este estudio, el tejido testicular no se conservó en pedazos pequeños, sino después de la disolución del complejo tisular- como una suspensión celular para que el crioprotector pueda penetrar células individuales más rápido. Este método ya se ha utilizado con éxito en algunas especies de mamíferos y fue adaptado por científicos del Leibniz-IZW para la conservación de células testiculares felinas. Para disolver el complejo de tejidosLo más suavemente posible, los investigadores de Leibniz-IZW combinaron los pasos de preparación mecánica con la interrupción de los contactos de célula a célula utilizando un cóctel de enzimas.
"Un problema particular en la criopreservación de tejidos o suspensiones celulares es la evaluación de la recuperación celular después de la descongelación. En última instancia, la funcionalidad celular solo se puede lograr en experimentos de cultivo celular a largo plazo. Sin embargo, para optimizar el proceso de congelación a corto plazo, utilizamos dos métodos para evaluar la viabilidad de las células ", explica Mohammad Bashawat, científico de Leibniz-IZW. Utilizando moléculas indicadoras fluorescentes, la concentración más baja de crioprotector combinada con una velocidad de congelación lenta fue claramente el método más beneficioso. Aproximadamente 45El porcentaje de células testiculares criopreservadas de gatos domésticos castrados fue vital nuevamente después de la descongelación. Se obtuvieron resultados comparativamente buenos en dos estudios piloto con células testiculares de un gato dorado asiático y un guepardo. El equipo de investigación de Leibniz-IZW ve esto como un paso importante para preservarLas líneas germinales de animales valiosos para futuras aplicaciones en el contexto de la conservación de especies y el mantenimiento de la diversidad en su geno.mes
De las 39 especies de gatos que existen actualmente, 25 están en la "Lista Roja" de la Unión Internacional para la Conservación de la Naturaleza UICN con un estado que varía de "vulnerable" a "en peligro crítico". Medidas para mejorar la reproducciónson cada vez más importantes para la conservación de la diversidad genética en estas especies. Estas medidas incluyen la criopreservación de células germinales y la inseminación artificial. Los testículos de machos que murieron o tuvieron que ser sacrificados contienen células madre y numerosos precursores inmaduros de células germinales masculinas. En el futuro, es de esperar que estos puedan madurar en espermatozoides durante la espermatogénesis en el "tubo de ensayo", como han demostrado previamente los grupos de investigación que trabajan con ratones y humanos. Para tener células testiculares de especies felinas disponibles para tales proyectos futuros, su criopreservación es lamétodo de elección, ya que esto permite un almacenamiento casi ilimitado de esta valiosa reserva genética "criobanco". Esto es especialmente cierto para las personas queh no puede suministrar esperma funcionalmente "maduro" debido a su edad o estado de salud.
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Materiales proporcionado por Forschungsverbund Berlin . Nota: El contenido puede ser editado por estilo y longitud.
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