En colaboración con las universidades de Miami, Columbia y San Francisco, científicos del Institut Pasteur, Inserm, CNRS, Collège de France, la Universidad de la Sorbona y la Universidad de Clermont Auvergne han logrado restablecer la audición en un modelo de sordera DFNB9 de ratón adulto- un trastorno auditivo que representa uno de los casos más frecuentes de sordera genética congénita. Las personas con sordera DFNB9 son profundamente sordas ya que son deficientes en la codificación genética de otoferlin, una proteína que es esencial para transmitir información sonora en la célula sensorial auditivasinapsis. Al realizar una inyección intracoclear de este gen en un modelo de ratón DFNB9 adulto, los científicos restauraron con éxito la función de sinapsis auditiva y los umbrales auditivos a un nivel casi normal. Estos hallazgos, publicados en la revista PNAS , abrir nuevas vías para futuros ensayos de terapia génica en pacientes con DFNB9.
Más de la mitad de los casos de sordera congénita profunda no sindrómica tienen una causa genética, y la mayoría ~ 80% de estos casos se deben a formas de sordera autosómica recesiva DFNB. Actualmente, los implantes cocleares son la única opción para recuperar la audición en estos pacientes.
Los virus adenoasociados AAV se encuentran entre los vectores más prometedores para la transferencia terapéutica de genes para tratar enfermedades humanas. La terapia génica basada en AAV es una opción terapéutica prometedora para tratar la sordera, pero su aplicación está limitada por una ventana terapéutica potencialmente estrecha.humanos, el desarrollo del oído interno se completa en el útero y la audición se hace posible aproximadamente a las 20 semanas de gestación. Además, las formas genéticas de sordera congénita generalmente se diagnostican durante el período neonatal. Por lo tanto, los enfoques de terapia génica en modelos animales deben tener esto en cuenta, yLa eficacia de la terapia génica debe demostrarse después de una inyección génica cuando el sistema auditivo ya está en su lugar. En otras palabras, la terapia debe revertir la sordera existente. El equipo dirigido por Saaïd Safieddine, investigador del CNRS en la Unidad de Genética y Fisiología de la Audición Institut Pasteur/ Inserm y coordinador del proyecto, utilizó un modelo de ratón de DFNB9, una forma de sordera humana que representa del 2 al 8% detodos los casos de sordera genética congénita.
La sordera DFNB9 es causada por mutaciones en el gen que codifica otoferlin, una proteína que juega un papel clave en la transmisión de información sonora en las sinapsis internas de las células ciliadas. Los ratones mutantes deficientes en otoferlin son profundamente sordos ya que estas sinapsis no liberan neurotransmisores en respuestapara la estimulación del sonido, a pesar de la ausencia de defectos epiteliales sensoriales detectables. Por lo tanto, los ratones DFNB9 constituyen un modelo apropiado para probar la eficacia de la terapia génica viral cuando se administra en una etapa tardía. Sin embargo, como los AAV tienen una capacidad limitada de empaquetamiento de ADN aproximadamente 4.7 kilobasekb, es difícil utilizar esta técnica para genes cuya región de codificación ADNc excede los 5 kb, como el gen que codifica otoferlin, que tiene una región de codificación de 6 kb. Los científicos han superado esta limitación adaptando un AAVenfoque conocido como estrategia dual AAV porque utiliza dos vectores recombinantes diferentes, uno que contiene el extremo 5 'y el otro el extremo 3' del ADNc de otoferlin.
Se usó una única inyección intracoclear del par de vectores en ratones mutantes adultos para reconstruir la región de codificación de otoferlin mediante la recombinación de segmentos de ADN en los extremos 5 'y 3', lo que condujo a la restauración a largo plazo de la expresión de otoferlin en las células ciliadas internas, yluego restableció la audición.
Por lo tanto, los científicos han obtenido una prueba inicial del concepto de transferencia viral de ADNc fragmentado en la cóclea utilizando dos vectores, lo que demuestra que este enfoque puede usarse para producir otoferlin y corregir de manera duradera el fenotipo de sordera profunda en ratones.
Los resultados obtenidos por los científicos sugieren que la ventana terapéutica para la transferencia local de genes en pacientes con sordera congénita DFNB9 podría ser más amplia de lo que se pensaba, y ofrece la esperanza de extender estos hallazgos a otras formas de sordera. Estos resultados son objeto de una patentesolicitud presentada
Además de las instituciones mencionadas en el primer párrafo, esta investigación fue financiada por la Fundación Francesa para la Investigación Médica, la Unión Europea TREAT RUSH y la Agencia Nacional de Investigación Francesa EargenCure y Lifesenses LabEx.
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Materiales proporcionado por Institut Pasteur . Nota: El contenido puede ser editado por estilo y longitud.
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